高壓滅菌器的主要操作方法：

1.首先在使用前應打開排氣閥、消毒閥、干燥閥及給水閥，加RO水或蒸餾水制玻璃管綠線處。

2.然后再關閉所有閥，設定滅菌時間（15~30分鐘左右）。

3.打開電源開關，將外鍋開始加熱加壓（此時電源開關及加熱燈亮，外鍋壓力表開始升壓）。

4.將待滅物放入內鍋，關緊鍋門。待外鍋壓力表達1.2 kg/cm2時，打開消毒閥。

5.待內鍋壓力表達，溫度上升至121時，再打開定時開關，自動計時約15~30分鐘后鳴叫，說明滅菌完成。

當滅菌完畢后，不可放氣減壓，否則瓶內液體會劇烈沸騰，沖掉瓶塞而外溢甚至導致容器爆裂。應待滅菌器內壓力降至與大氣壓相等后才可開蓋。